Efecto de la proteína ews/fli1 sobre la expresión del gen dickkopf-1 y la vía wnt/beta-catenina en sarcoma de ewing

Abstract

Los tumores de la familia del sarcoma de Ewing son tumores altamente agresivos que afectan principalmente a niños y adolescentes. Se caracterizan por translocaciones cromosómicas que generan proteínas de fusión entre EWS (o muy raramente FUS) y miembros de la familia ETS de factores de transcripción, que son capaces de transformar células. La actividad transformante de EWS/FLI1, la fusión más frecuente, parece residir en su capacidad para activar o reprimir genes diana específicos. Nosotros presentamos evidencias que demuestran que el inhibidor y, a la vez, gen diana de Wnt/ß-catenina, DICKKOPF-1 (DKK-1), es una diana transcripcional de EWS/FLI1, que inhibe tanto su transcripción basal como la inducida por ß-catenina y este efecto inhibitorio es independiente de la expresión de la proteína c-Myc. Además, nuestros datos indican que EWS/FLI1 tiene un efecto más general sobre la transcripción mediada por ß-catenina/TCF, ya que bloquea la transcripción a partir de un promotor sintético con elementos de respuesta consenso para ß-catenina/TCF. En consonancia, distintas líneas de Ewing que expresan diferentes translocaciones EWS/ETS apenas presentan actividad transcripcional ß-catenina/TCF, mientras que el silenciamiento de EWS/FLI1 en células A673 y RD-ES de sarcoma de Ewing restaura su capacidad de respuesta a ß-catenina. En este mismo sentido, el análisis bioinformático GSEA demostró un enriquecimiento en genes diana de ß-catenina/TCF entre los genes reprimidos por EWS/FLI1 en la línea celular A673. Mecanísticamente, los efectos inhibitorios de EWS/FLI1 pueden ser rescatados por una forma constitutivamente activa de TCF4 (TCF4-VP16). Además, EWS/FLI1 se une a LEF-1, un miembro de la familia TCF/LEF, e interfiere con su unión a ß-catenina, lo que puede explicar su efecto negativo sobre la transcripción mediada por ß- catenin/TCF. Nuestros resultados demuestran que EWS/FLI1 inhibe tanto la expresión de DKK-1, como la transcripción dependiente de ß-catenina/TCF, lo que podría contribuir a la progresión de los tumores de la familia del sarcoma de Ewing.