Uso de suturas recubiertas de células madre derivadas de lipoaspirado (biosuturas) en anastomosis traqueales. Estudio experimental en rata

  1. HRISTOV, TIHOMIR GEORGIEV
Supervised by:
  1. Damián García Olmo Director
  2. Mariano Andrés García Arranz Director

Defence university: Universidad Autónoma de Madrid

Fecha de defensa: 20 June 2013

Committee:
  1. Andrés Varela de Ugarte Chair
  2. Francisco García Río Secretary
  3. Isabel Pascual Migueláñez Committee member
  4. María Eugenia Fernández Santos Committee member
  5. Josep Maria Canals Coll Committee member

Type: Thesis

Teseo: 355880 DIALNET
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Abstract

Antecedentes del tema: Estudios experimentales y clínicos han demostrado que las células troncales derivadas de lipoaspirado (ASCs, Adipose-derived Stem Cells) tienen un papel importante en la inflamación y regeneración a través de las capacidades inmunomoduladoras, proangiogénicas y diferenciación hacía otros tipos celulares, aunque los mecanismos exactos no se conocen en profundidad. En el campo de la cirugía, la inflamación aguda puede tener un papel perjudicial, especialmente en zonas de cicatrización dificultosa como la tráquea. Se ha observado que las ASCs tienen un efecto inmunomodulador importante en la inflamación crónica y las reacciones autoinmunes. Sin embargo, este efecto está todavía sin explorar en la fase de la inflamación aguda. Con el presente trabajo se pretende estudiar el efecto de estas células aplicadas localmente en un modelo de resección y anastomosis traqueal en rata (modelo de inflamación postoperatoria). Materiales y métodos: Inicialmente se obtuvieron ASCs del tejido subcutáneo de 2 ratas BDIX y tras cultivo e infección con lentivirus para la expresión de proteína verde fluorescente (eGFP), las células se cultivaron con hilos de sutura de polyglactin 910 (Vicryl®) con el fin de obtener biosuturas (suturas recubiertas con células troncales). A 90 ratas de la cepa BDIX se practicó la resección de 3 anillos traqueales y la posterior anastomosis con biosuturas (0.5x106 células/sutura [grupo 1] o 1.5x106 células/sutura [grupo 2]) o sutura convencional (grupo 3). Los animales se sacrificaron a los días 1, 4, 10, 30 y 60 y las regiones de las anastomosis traqueales se examinaron macroscópicamente, con microscopía óptica y fluorescente, identificando la presencia de efectos adversos, adherencias peritraqueales y tipo de inflamación con los principales tipos de células inflamatorias involucrados. Se comparó la resistencia a presión interna entre los grupos y se analizaron los resultados. Resultados: A tiempos cortos (1 y 4 días), los grupos de biosuturas presentaron un patrón atípico de inflamación aguda, caracterizado por la ausencia de neutrófilos y presencia de abundantes linfocitos y células plasmáticas. En el primer día después de la anastomosis, mediante marcado y detección por inmunofluorescencia, se observaron abundantes monocitos/macrófagos entorno a los vasos sanguíneos adyacentes a las biosuturas y entre las fibras de su hilo trenzado. Por el contrario, en los grupos con suturas convencionales, la presencia de monocitos/macrófagos fue discreta. No hubo diferencias significativas en cuanto los valores máximos de resistencia a presión entre los grupos estudiados. No se evidenció crecimiento tumoral ni otras reacciones adversas. Conclusión: La aparente supresión local de la inflamación aguda (aumento de la migración de macrófagos y disminución de la infiltración por neutrófilos) y el cambio temprano de inflamación aguda a crónica, encontrada en los grupos con células troncales, podría abrir nuevos horizontes de investigación y ampliar el espectro de aplicación de las ASCs. Palabras clave: células troncales mesenquimales, células troncales derivadas del tejido adiposo, anastomosis traqueal, cicatrización traqueal, biosuturas